DNK sinteziniň esasy ýörelgesi

Himiki DNK sintezi gaty fazaly sintez strategiýasyna we fosforamidit himiýasyna esaslanýar.Biologiki DNK sintezinden tapawutlylykda, 1-nji suratda görkezilişi ýaly himiki DNK sintezindäki material DMT (4, 4-dimetoksitritil) we fosforamidit üýtgedilen deoksiriboksiddir. DNK sintezi berk goldawda amala aşyrylýar (dürli-dürli hödürläp bileris)Oligo sintez sütüni), ýagny CPG (gözegçilikli gözenek aýna) we PS (polistirol) we tutuş sintez aDNK / RNK sintezatoryesasy enjamymyz bolan dürli modelleri bar: HY leeke kanal sintezatory, HY-12, HY-192 we ş.m., sinteziň ugry 3-den 5-e çenli we nukleotid berk goldaw üçin biriniň üsti bilen girizilýär. sintez sikli.Adatça sintez siklinde dört ädim bar, Deproteksiýa, jübütlemek, gaplamak we okislenmek (2-nji surat).Deproteksiýa berk goldawdaky DMT toparyny ýa-da öňki nukleoziddäki 5 'gidroksil toparyny aýyrmak üçin niýetlenendir, diklorometanda 3% trihloroasetik kislota ýok etmek reagenti hökmünde ulanylýar.Soňra fosforamidit üýtgedilen deoksiriboksidiň aktiwatoryň kömegi bilen gidroksil toparyna täsir etmegine rugsat berildi, ýagny 5-etiltiotetrazol ýa-da 4, 5-disikanoimidazol, fosfitetri (III) emele getirdi we Jübütlemek ädimini amala aşyrdy.Baglanyş ädiminde reaksiýa berilmedik gidroksil toparyny blokirlemek, islenmeýän kemçilik yzygiderliliginiň döremegini azaltmak üçin bir ädim ädilýär.Ahyrynda durnuksyz fosfitetriester (III) piridiniň häzirki döwründe oksidant hökmünde ýod bilen himiki durnukly fosfortersere (V) okislenýär.

Sintezlenen DNK aminoliziň berk goldawyndan aýrylyp bilner, fosfortesterdäki 2-sianetil goralýan topar we nukleobazadaky amid bir wagtyň özünde ýarylýar, sintez plitalary we sintez sütünleri göni reaksiýa kamerasyna ýerleşdirilýär. ofGorag enjamlary.Çig DNK isleg boýunça HPLC, elektroforez we OPC tarapyndan taýýarlanyp bilner, size hem berip bilerisArassalaýyş enjamlarygaýtadan işlemek üçin.